Turinys
- Pirminis skirtumas
- Palyginimo diagrama
- Pietinio pūtimo apibrėžimas
- Šiaurės pūtimo apibrėžimas
- Skirtumai trumpai
- Išvada
Pirminis skirtumas
Kai kurie žmonės nesugeba išsiaiškinti tikrojo skirtumo tarp pietinio ir šiaurinio pūtimo. Todėl šiame straipsnyje paaiškinsime išsamią sampratą apie šiaurinio pūtimo ir palyginimo principus, jų darbo sąvokas ir pagrindinius skirtumus. Ar žinote, koks yra pagrindinis skirtumas tarp pietinio ir šiaurinio pūtimo? Pietinis blotinimas yra apibrėžtas kaip metodas, kuris dažniausiai naudojamas tuo metu, kai norime sužinoti, ar tam tikrame mėginyje neatsiranda kokių nors konkrečių DNR fragmentų. Tačiau iš kitos pusės šiaurinis blotinimas yra procesas, naudojamas RNR aptikti, kuris visas yra atskirtas elektroforezės būdu. Southern blotting yra procesas, kurį įprastu pagrindu atlieka naudodamasi molekuline biologija. Pagrindinis jo tikslas yra patikrinti, ar DNR pavyzdyje yra DNR seka. Pietų blotinimas yra agarozės gelio elektroforezės derinys, palaikantis DNR atskyrimą pagal dydį pagal kai kuriuos metodus. Jie naudoja šiuos metodus tik tam, kad perkeltų DNR dydį į filtro membraną zondo hibridizavimui. Atvirkščiai, Northern blot apibūdinamas metodu, kuris yra daug naudojamas molekulinės biologijos tyrimuose tik tam, kad būtų galima atlikti genų ekspresijos tiriamąjį darbą. Na, pagrindinis skirtumas, pastebimas šiame metode, yra susijęs su formaldehido pridėjimu agarozės gelyje, atliekančiame denatūratoriaus vaidmenį. Atliekant šiaurinį blotėjimą, substrato nukleino rūgštis laikoma išskirtų DNR fragmentų surinkimu. Visa tai išgaunama iš audinio ir žymima radioaktyviai.
Palyginimo diagrama
| Pietų pūtimas | Šiaurės pūtimas | |
| Įvadas | Southern blotting pirmą kartą buvo sukurtas E. M. Southern 70-aisiais. | Šį metodą Alwine'as ir jo kolegos sukūrė aštuntajame dešimtmetyje. |
| Funkcija | Vyks DNR atskyrimas. | Vyks RNR atskyrimas. |
| Denatūracija | Denatūracijos poreikis. | Nereikia denatūruoti. |
| Hibridizacija | DNR-DNR hibridizacija | RNR-DNR hibridizacija |
Pietinio pūtimo apibrėžimas
Southern blotting pirmą kartą buvo sukurtas E. M. Southern 70-aisiais. Pietiniame pūtime yra visa DNR, kuri yra išgaunama iš žmogaus ląstelės. Po to, naudojant restrikcijos fermentą, jis iki galo supjaustomas į fragmentus. Kai tik šie fragmentai bus atskirti naudojant elektroforezės procesą. Tada jie bus paversti juostomis, įtrauktomis į tiek daug tos DNR kopijų. Jūs netgi galite padaryti šias juostas matomomis tam tikru dažymo būdu. Po kurio laiko šios juostos bus perkeltos į nitroceliuliozės filtrą. Tada gaunamas tirpalas, naudojamas praeinant pro gelį ir net filtruojant popierinį rankšluostį. Šis visas metodas bus sukurtas gaminant nitroceliuliozės filtrą, naudojant visus DNR fragmentus, kurie perkeliami į filtrą. Trumpai tariant, šis metodas suteikia išsamią informaciją apie DNR dydžio ir identifikavimo sąvoką.
Šiaurės pūtimo apibrėžimas
Kitą dieną diskutuosime apie šiaurinį pūtimą! Šį metodą Alwine'as ir jo kolegos sukūrė aštuntajame dešimtmetyje. Šiuo metodu RNR yra išgaunama tiesiai iš pateikto mėginio. Pažiūrėsite, kad teisingai naudojant šį metodą įvyks elektroforezė ir tada RNR atsiskirs pagal dydį. Taigi proceso pabaigoje RNR pasislinks į membraną ir pritvirtins, naudodama UV šviesą ir šilumą. Taikant šį metodą, RNR ekstrahuojama elektroforezės būdu, o po to hibridizuojama. Jo veikimas labai skyrėsi nuo Pietų blotinimo, nes jis yra susijęs su RNR veikimu ir neturi jokios įtakos DNR.
Skirtumai trumpai
- Pietinis buvo tas, kuris pristatė šią pietų pūtimo metodiką. Šiaurinį pūtimą sukūrė alvinas.
- Pietiniame blotrinime bus atskirtos DNR, o Šiaurės blotinge - RNR atskyrimas.
- Atliekant šiaurinį blotinimą, denatūracija nereikalinga, tačiau manoma, kad tai labai svarbu atliekant pietų blotinimą.
- Nitroceliuliozės filtro membrana naudojama atliekant pietų blotinimą, tačiau šiaurinėje dalyje ji nėra reikalinga.
- DNR ir DNR hibridizacija įvyks pietų pūtimo metu. RNR ir DNR hibridizacija paprastai vyksta atliekant šiaurinį blotinimą.
- Aminobenzoiloksimetilo filtravimo popierius naudojamas šiaurinio blotinimo metodui, tačiau jums jo nereikia naudoti atliekant pietų blotinimo metodą.
Išvada
Du terminai, kurie yra gana nežinomi žmonėms ir net tiems, kurie yra susiję su šia tema. Todėl šiame straipsnyje išdėstyti pagrindiniai dalykai apie juos, pateikta pakankamai detalių, kad žmonės suprastų, ir tada paaiškino skirtumus tarp jų, ir tai paaiškins jų taikymo sritį.
